Thiết lập kỹ thuật nested - PCR phát hiện gen hpc100 chẩn đoán nhiễm nấm Histoplasma capsulatum

Các tác giả

  • Đỗ Ngọc Ánh Học viện Quân y, Hà Nội
  • Nguyễn Khắc Lực Học viện Quân y, Hà Nội
  • Nguyễn Thị Như Quỳnh Học viện Quân y, Hà Nội
  • Tạ Bá Thắng Bệnh viện Quân y 103, Hà Nội
  • Nguyễn Thanh Tùng Bệnh viện Quân y 103, Hà Nội
  • Lương Minh Hòa Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, Hà Nội
  • Đỗ Bích Ngọc Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, Hà Nội
  • Phạm Thanh Hải Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, Hà Nội
  • Minoru Nagi Viện các Bệnh truyền nhiễm Quốc gia, Nhật Bản
  • Miyazaki Yoshitsugu Viện các Bệnh truyền nhiễm Quốc gia, Nhật Bản
  • Hoàng Thị Thu Hà Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương, Hà Nội

DOI:

https://doi.org/10.51403/0868-2836/2021/312

Từ khóa:

PCR lồng, phát hiện, gen Hpc, Histoplasma capsulatum

Tóm tắt

Nghiên cứu nhằm mục tiêu thiết lập các điều kiện của kỹ thuật nested PCR để phát hiện nhiễm nấm Histoplasma capsulatum dựa vào gen đích Hcp100. Kỹ thuật sau khi xây dựng được thử nghiệm đánh giá trên ADN tổng số tách chiết từ các mẫu dịch rửa phế quản của bệnh nhân có hội chứng viêm đường hô hấp dưới. Kết quả nghiên cứu cho thấy, kỹ thuật nested PCR với phản ứng PCR1 (cặp mồi HcI, HcII) cho kết quả tốt khi nồng độ Mg2+ là 2,0mM, nhiệt độ gắn mồi 50oC; phản ứng PCR2 cho kết quả tốt khi nồng độ Mg2+ là 1,5mM, nhiệt độ gắn mồi 65oC. Giới hạn phát hiện của kỹ thuật là 10fg ADN plasmid của nấm H. capsulatum. Các mồi sử dụng cho kỹ thuật nested-PCR có tính đặc hiệu cao với nấm H. capsulatum. Để đánh giá hiệu quả của kỹ thuật nested PCR đã xây dựng, 96 mẫu ADN tách chiết từ dịch rửa phế quản của bệnh nhân có hội chứng viêm đường hô hấp dưới đã được kiểm tra và đều cho kết quả ấm tính. Nuôi cấy cũng cho kết quả tương tự. Đây là kỹ thuật cho kết quả nhanh, tin cậy và có thể lựa chọn để phát hiện nhiễm nấm H. capsulatum.

Tải xuống

Dữ liệu tải xuống chưa có sẵn.

Đã Xuất bản

12-06-2021

Cách trích dẫn

Ánh, Đỗ N. ., Lực, N. K. ., Quỳnh, N. T. N. ., Thắng, T. B. ., Tùng, N. T. ., Hòa, L. M. ., Ngọc, Đỗ B. ., Hải, P. T. ., Nagi, M. ., Yoshitsugu, M. ., & Hà, H. T. T. . (2021). Thiết lập kỹ thuật nested - PCR phát hiện gen hpc100 chẩn đoán nhiễm nấm Histoplasma capsulatum. Tạp Chí Y học Dự phòng, 31(3), 37–44. https://doi.org/10.51403/0868-2836/2021/312

Số

Chuyên mục

Bài báo nghiên cứu gốc

Các bài báo được đọc nhiều nhất của cùng tác giả

<< < 1 2 3 4